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芦丁对LPS诱导瘤胃上皮细胞炎症损伤的干预作用及其机制的探讨

日期:2024年04月08日 编辑:ad201107111759308692 作者:无忧论文网 点击次数:131
论文价格:150元/篇 论文编号:lw202403271704142248 论文字数:43522 所属栏目:农业论文
论文地区:中国 论文语种:中文 论文用途:硕士毕业论文 Master Thesis
尤其是关于消化时间、收集时间点的报道还十分少见。因此,本试验在前人研究基础上进行优化处理,根据瘤胃组织状态判断胰酶的具体消化时间。本试验采用0.25%-0.02%EDTA胰蛋白酶对新鲜的瘤胃组织进行不同时间的连续消化,每次消化完成后在显微镜下观察消化液确定是否开始收集。本试验共进行6次消化,前三次消化液弃去,从第4次开始收集消化液以及洗涤液。由于成年羊的瘤胃上皮角质化程度较高,因此,本试验为了去除角质层细胞,前三次消化时间较长,时间依次为30 min、20 min、15 min,消化至第三次时镜下观察角质层细胞开始减少,棘层和基底层细胞逐渐变多,适当缩短了消化时间避免胰蛋白酶对瘤胃上皮细胞造成不可逆的损伤影响细胞活力导致不贴壁,本试验后三次消化时间依次为10 min、8 min、5 min,此时镜下可见基底层、棘层细胞数量远大于角质层细胞。但经过多次分离培养瘤胃上皮细胞发现胰蛋白酶消化时间不是一成不变的,应根据组织角质化程度不同适当调整消化时间,以确保瘤胃上皮细胞的贴壁能力。

5 结论

本试验条件下,得到以下结论:

(1)采用0.25%-0.02%EDTA的胰蛋白酶对瘤胃上皮黏膜层进行5次不同时间(30、20、15、10、8、5 min)的连续消化可成功分离得到绵羊瘤胃上皮细胞。

(2)1 μg/mL的LPS刺激瘤胃上皮细胞9 h建立瘤胃上皮细胞炎症损伤模型。

(3)100 μg/mL的芦丁预处理8 h可以缓解由LPS诱导的瘤胃上皮细胞炎症损伤。

(4)芦丁可以通过NF-κB/MAPK信号通路的活化来缓解LPS诱导的瘤胃上皮细胞的炎症损伤的分子机制。

参考文献(略)