本文是一篇药学论文,本实验将收集于辽宁、吉林、黑龙江、内蒙古等地共 22 份北苍术种子依据《农作物种子检验规程》划分为 3 个等级,除河北以及内蒙古 3 号产地的北苍术种子外,其余产地北苍术种子质量均达到优质水平。本文初步制定了北苍术种子质量分级标准,为维护北苍术种子的市场秩序提供重要理论依据,同时也为促进中药材产业更好地的发展奠定基础。
第一章 北苍术质量研究
第一节 北苍术挥发性成分含量测定及比较
迄今为止,从北苍术中分离得到的成分主要以挥发油为主,挥发油成分被认为是苍术的主要药理活性成分, 挥发油中苍术酮、β-桉叶醇及苍术素等组分因在苍术总挥发油中含量大,且疗效明确被广泛研究,甚至被作为苍术鉴定的特征成分或质量评价的指标成分[20-23]。故本实验对产自辽宁地区 48 个批次北苍术样品的 3 种挥发性化学成分苍术素、苍术酮、β-桉叶醇进行含量测定。
材料与方法
1 实验材料
1.1 实验仪器 Aglient 6890N(FID)气相色谱仪;HP-5(0.32 mm×30 m)石英弹性毛细管柱;JD60-4 电子天平(沈阳龙腾电子有限公司);CP225D 型电子天平(德国 Sartorius公司);KQ5200DB 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FW100 型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);DHG-9145A 型鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);WKY II2 型微量移液器(上海佳安分析仪器厂),TGL-16M 型高速离心机(湖南湘仪实验仪器开发有限公司)。
1.2 实验材料 纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);正己烷(分析纯,天津科密欧试剂有限公司);正十六醇(纯度≥99%);苍术素(纯度≥98%)、β-桉叶醇(纯度≥98%)、苍术酮(纯度≥85%)、以上对照品均购于上海源叶生物科技有限公司。北苍术样品分别收集于辽宁省朝阳、兴城、新宾、清源、桓仁、宽甸、等地等市及所属县区,经辽宁中医药大学尹海波教授鉴定为北苍术 Atractylodes chinensis (DC.) Koidz,样品信息见表 1-1。两种植株性状北苍术图片见图 1-1、图 1-2。
第二节 北苍术苍术苷 A 成分含量测定及比较
北苍术的非挥发性成分中水溶性成分具有保肝、抗胃溃疡、抗炎、抗肿瘤等药理活性[4,6,12-13],其中最具代表性且含量较高的苍术苷 A,具有健脾、调节免疫等药理作用,研究价值较为突出[14,16]。本实验对产自辽宁省的 48 批北苍术植物水溶性成分苍术苷 A进行含量测定。材料与方法
1 实验材料
1.1 实验仪器 Agilent 1260(ELSD)高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司);Symmetry C18色谱柱(美国 Waters 公司);JD60-4 电子天平(沈阳龙腾电子有限公司);PT-35SL 微量电子天平(华志电子科技有限公);KQ5200DB 型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FW100 型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);DHG9145A型鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);WKY II2 型微量移液器(上海佳安分析仪器厂)。
1.2 实验材料
纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);苍术苷 A(纯度≥85%)上海源叶生物科技有限公司;乙腈(色谱纯,德国默克集团)。北苍术苍术样品分别收集于辽宁省朝阳、兴城、新宾、清源、桓仁、宽甸、等地等市及所属县区,经辽宁中医药大学尹海波教授为北苍术 Atractylodes chinensis (DC. ) K oidz。
2 实验方法
2.1 色谱条件
乙腈(A),水(B)为流动相,梯度洗脱(0~9 min,4%~7%A;9~18 min,7%~16%A,18~25 min,16%A)流速 1.0 mL /min,柱温 30℃,漂移管温度 49±1℃,氮气压力:3.0×105Pa,进样量为 20 μL。色谱图见图 1-5。
第二章 北苍术不同产地土壤因子研究
第一节 土壤 pH 值、含水量、机械组成及团粒结构研究材料与方法
1 实验材料
1.1 实验仪器 PHS-3E 型酸度计(上海仪电科学仪器股份有限公司);DHG-9145A 型鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);PT-35 SL 微量电子天平(华志电子科技有限公司);铝盒;土壤颗粒分析吸管;洗筛(直径 6 cm,孔径 0.25 mm);1000 mL 量筒;250 mL 三角瓶;往返式震荡机;干燥器;温度计;洗耳球等。
1.2 实验材料 纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);pH 4.01 标准缓冲液;pH 6.87 标准缓冲液;pH 9.18 标准缓冲液;0.5 mol/L NaO H 溶液等。土壤样品与北苍术样品来源相同,分别收集于辽宁省朝阳、兴城、新宾、清源、桓仁、宽甸、等地等市及所属县区(表2-1)。
第二节 北苍术土壤有机质与腐殖质研究材料与方法
1 实验材料1.1 实验仪器 酸式滴定装置,PT-35SL 微量电子天平(华志电子科技有限公司)
1.2 实验材料 1 mol/L 重铬酸钾溶液;0.5 mol/L 硫酸亚铁溶液;邻菲罗啉指示剂;二氧化硅;浓硫酸。24 批土壤样品(表 2-1)。
2 实验方法2.1 土壤有机质含量测定严格依据《中华人民共和国农业行业标准》NY/T1121.6-2006 方法测定[27]。采用以下方法进行数据处理。
24 个产地的北苍术根际土有机质含量为 4.27 g/kg~21.62 g/kg,其中 17 号、7 号产地有机质含量颇高,分别为21.62 g/kg、21.05 g/kg,4 号产地有机质含量最低,为 4.27 g/kg,共有 11 个产地有机质含量高于平均值 12.77 g/kg;腐殖质含量为 2.25 g/kg~11.40 g/kg,其含量水平与有机质含量变化程度几近相同,有 11 个产地有机质含量高于平均值 6.73g/kg,有机质含量与腐殖质含量变异系数同为 0.42,表明不同北苍术产地土壤中两者含量差异较大(表 2-4)。
第三章 北苍术不同产地气象因子研究实验方法.........................61
实验结果.............................65
讨论............................65
小结................................65
第四章 北苍术不同产地栽培因子研究材料与方法.............67
实验结果.......................67
讨论..............................69
小结..............................70
第五章 栽培北苍术质量生态位适宜度数学模型的建立....................70
实验方法............................71
实验结果...................................75
讨论
目前,大多数中药材种子的质量分级标准还处于缺失状态,部分市售中药材种子质量参差不齐,市场中也存在假冒伪劣种子以及地方习用品种子充售正品中药材种子的现象,这导致用其生产出的中药材质量和疗效难以保证,严重影响到药材市场秩序[33-37]。由此看来,推出中药材种子质量分级标准是势在必行的首要事件[38-41]。因此,本实验对从北苍术主产地收集到的共 22 份北苍术种子,严格依据《农作物种子检验规程》[30]中各个质量指标进行检测,并将检验结果加以整理及分析,将 22 份北苍术种子分为 3 个等级,初步制定了北苍术种子质量分级标准,为维护北苍术种子的市场秩序提供重要理论依据,同时也为促进中药材产业更好地的发展奠定基础。
随着中医药现代化进程的不断加快,人类对于中医药相关知识有了更加深入的了解,对于中药材的需求量也逐渐增加。但是北苍术药材及其种子的销售环节依旧存在着一些不可忽视的问题,货源以假乱真、质量良莠不齐等销售不规范的现象屡见不鲜。追根溯源,种子是影响药材质量的根本,从源头规范北苍术种子的市售标准,可在一定程度上把控北苍术的药材质量,因此,北苍术种子质量分级标准的推出尤为紧要。本文对从我国北苍术主产地收集到的北苍术种子,进行检验与统计分析,最后初步制定了北苍术种子质量分级标准,以期其能为肃清北苍术种子市售不规范现象提供依据,从而为北苍术药材的质量提供保证。
结论
1 北苍术质量检验
本文对 24 个产区两种叶型的北苍术药材进行挥发性成分β-桉叶醇、苍术酮、苍术素,水溶性成分苍术苷 A,以及水分和总灰分进行了含量检测,其化学成分、水分与总灰分的含量与植株形态并不具备明显的相关性。苍术素为 2020 版《中国药典》规定北苍术药材的指标性成分,在辽西产区的北苍术药材中含量较高,表明北苍术质量较好。北苍术药材中β-桉叶醇与苍术素的含量直接受根重的影响,量重着质优,在一定程度上可通过外观形态初步判断北苍术药材质量,对于北苍术药材种植技术具有一定的指导意义。
2 土壤因子对北苍术质量的影响
与北苍术化学成分具有显著相关性的土壤因子有 6 个,影响β-桉叶醇含量积累的主要因素有土壤含水量、钙元素含量、镁元素含量;影响苍术苷 A 含量积累的因素主要为土壤中铁元素含量以及土壤粒径为 0.05~0.01 mm、0.01~0.005 mm 粒级的团粒含量占比。不同北苍术产地土壤均呈现弱酸性,土壤以砂质黏壤与砂壤居多,更适合北苍术生长。
3 气象因子对北苍术质量的影响
辽宁地区属温带季风气候,四季分明,昼夜温差大,对北苍术药材的生长及有效成分的积累均有帮助。月均降水量、月均气温、年均日