痴呆女黄××的亲属控告村民黄金×强奸其女至孕,黄金×仅承认有猥亵行为,并未强奸,因此当地公安局要求本站协助鉴定妇女黄××所怀胎儿是否为黄金×亲子。经常规血清学方法鉴定,相对亲子概率为95.55%,为慎重起见又应用序列特异性引物扩增方法(PCR-SSP)检测人类白细胞抗原DRB基因(HLA-DRB),发现可以排除,再加做P血型,也同样得出排除结果。现报告如下。
1 材料和方法
1.1 鉴定对象 黄××及其引产胎儿、黄金×静脉血各6ml,置肝素抗凝管中。1.2 红细胞血型鉴定 按常规方法检查ABO、Rh、MN、P血型。1.3 HLA-A、B抗原分型 采用美国GTI的血清盘,批号为GTI-720R-LOT 3.4,应用NIH标准微量淋巴细胞毒方法进行分型[1]。1.4 HLA-DRB基因分型 由上海市输血研究所HLA实验室提供HLA-DRB基因分型试剂盒,批号为:971120,应用DNA序列特异性引物扩增(PCR-SSP)方法;主要仪器有PE-9600 DNA扩增仪(美国)和Bio-Rad电泳及紫外透射系统(美国)。1.5 计算方法 采用上海市血液中心提供的亲子鉴定软盘,使用中国南方人群基因频率数值[2]。
2 结果
各血型系统检查结果见附表,HLA-DRB基因分型结果见附图。检查ABO、Rh、MN3个红细胞血型系统及HLA-A、B位点均不能排除黄××的胎儿与黄金×的亲子关系,但运用PCR-SSP方法进行HLA-DRB分型则排除有亲子关系,再加做P血型也同样得出排除结论。
3 讨论
HLA是人类最富遗传多态性的系统,广泛应用于亲子鉴定工作。目前亲子鉴定多数是采用HLA-A、B分型结合红细胞血型(ABO、Rh、MN、P)检测,亲子关系概率一般可达到95%以上[3],参照Brgant的标准和国内习惯,亲子鉴定相对概率在90%以上为很可能有亲子关系[4]。本例在做HLA-DRB位点之前相对亲子概率为95.55%,但加做HLA-DRB位点结果则为排除,从而避免了一件错无忧论文网案。因此提示一般案件要尽可能多做几个血型系统以提高相对亲子概率,避免差错可能性。国内类似的报道[5]也说明了增加HLA-DR分型可提高鉴定的可靠性。由于HLA-DR血清学分型较为复杂且好的血清盘不易获得,结果往往不大理想,从而产生分型困难。而PCR-SSP方法可使用冻存血液,用血量少,出结果快,特异性好,重复性强,可做为常规方法亲子鉴定相对概率较低的案件进行补充,以提高亲子鉴定的可靠性。
参考文献
1 Terask PI,McClelland TB.Microdroplet testing for-HLA-A、B、Cand D.Am J Clin Pathol, 1978;69∶103
2 赵桐茂.亲子鉴定.北京:人民卫生出版社,1988;220~237
3 赵桐茂.亲子鉴定.北京:人民卫生出版社,1988;119
4 赵桐茂.人类血型遗传学.北京:科学出版社,1987;347
5 郑素琴,张工梁,顾文娟,等.HLA-DR和DQ分型应用于亲子鉴定.法医学杂志, 1992;8(2)∶89
