1 实验资料 采用玻璃制作微囊发生器(图1),这种单口微囊发生器分为两个部分,第一部分(A)为下层套管,上方为磨砂口,可与上层套管(B)紧密套接,其下方变细,约4 cm长,内经约4 mm;第二部分的上层套管(B)由内外两层套管所组成,长约7 cm,其中外层套管的上1/3处有一个进气口,允许氮气通入,内层套管与外层套管进气口相对应的部位有3个直径约3 mm的小孔,内层套管的下端可接普通注射针头.上层套管和下层套管可通过图1(C)的方式套接在一起.内层套管的针头约伸出1~2 mm.给上层套管的下方接上相应的麻醉针头(7~9号)(上海埃斯埃医械塑料制品有限公司),针头末端为平端.上层套管和下层套管套接在一起,并固定于支架上.给上层套管内注入15 g•L-1的海藻酸钠混悬液,然后从进气管灌入氮气,压力为0.02~0.1 mPa.液滴形成后滴入11 g•L-1CaCl2中.显微镜下观察微囊的大小和形状,并用测微尺测量微囊的直径.观察不同气压、不同孔径大小麻醉针头等因素对微囊大小的影响.在证明单口气流切割式微囊发生器能够有效使用的基础上,依据相同的原理,制作了多口的气流切割式微囊发生器,其特点在于也分为上下两层套管,上层套管的下方配有4个针头的接口,可同时套接4个麻醉针,同时,下层套管的下方相应的也延伸出4个细管.实验条件同单口微囊发生器.
7~9号麻醉针头的针管外径分别为0.70,0.80和0.90mm,针管最小内径分别为0.37,0.47和0.57 mm.随着针孔直径的增加,在同一气压下,所形成的微囊的直径减小.针孔直径固定的情况下,随着压力的增大,微囊的直径逐渐减小,但并非呈线性关系(图2).此外,液面的高度也会对微囊的直径产生轻微的影响,液面过低时,产生微囊的均一性较差.
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2 讨论 近年来,微囊包裹细胞的方法和所使用的材料不断完善和丰富[1].我们所设计的单口微囊发生器可选择相应大小的针头;容易拆卸和安装,效率随着压力增大,微囊直径减小[2].多口气流切割式微囊发生器可处理20 mL的海藻酸钠混悬液,时间也相应缩短.
【参考文献】
[1]薛毅珑.重视微囊化人工细胞在医学中的应用[J].解放军医学杂志,1999; 24(4): 235-236.
[2]段小红,郭大刚,www.51lunwen.c徐可为,吴军正,刘 斌.永生化下颌骨髁突软
骨细胞的微囊化研究[J].生物医学工程杂志,2002; 19(4):639-641.