各参数在反映DNA降解速率的敏感时段各有侧重,为均衡起见,可采用多参数的多元线性回归方程予以校正或综合考量。
DNA是具有显著生化稳定性的遗传物质,同物种不同组织的体细胞DNA含量是恒定的[6]。DNA在死后立即开始降解,并在死后72 h内以相对恒定的速率加速降解,且很少受死亡机制的影响[7]。由于在本研究的实验环境下死亡36 h后人脑组织自溶严重而较难被薄层涂片,故研究时间选择在死后36 h内。通常人脑组织因有坚固的屏障保护而不易受到外部挤压等直接损害,远离肠管、体表等而不易受到微生物的侵扰、腐败,故其DNA降解所受干扰相对较少。本研究的部分标本为脑损伤致死案例,检材部位均无明显瘀血、水肿,且远离创伤区域。本研究的标本采样为细胞涂片技术,因为本研究的直接目的为细胞核DNA含量的定量分析,选择细胞涂片可以较好地保证细胞核相关信息的完整性,即细胞核结构完整、组织标本新鲜;组织切片得到的细胞核形态由于切割的角度不同会出现同一细胞的切面大小不一,且只能体现某个切面的状况,不能有效地反映整个细胞核整体信息,即使通过三维重建等图像处理亦可能会导致整体信息的缺失或失真,显然,组织切片更适合于定性分析。
目前亦有以流式细胞术为主的多种研究方法[7~10]
证实细胞核DNA降解与PMI存在相关性,但多数以动物为研究对象,且有明显的局限性。同时要求新鲜样本(或保存于-70℃),在法医实践中难以保证。此外,推断PMI的理想参数应与PMI呈连续的线性相关,本研究所选图像分析的灰度参数亦符合该要求。
图像分析技术具有可选参数多、客观性强,重复性好等特点,是推断人体
