法包括病毒分离、免疫学检测和 PCR/Real-timePCR 等。病毒分离操作繁琐,耗时久,敏感性低又易污染。免疫学检测常出现假阳性和假阴性结果。PCR 需要精密笨重的仪器设备,反应时间也较长,不能满足疫情爆发时现场快速诊断的需要。对于腺病毒核酸检测来说,一个重要的特点不同型别的病毒的序列变异较大,因此,建立的方法应尽可能覆盖足够多的型别。本研究中,我们以腺病毒为研究对象,建立腺病毒的 RPA 检测方法,对方法的敏感性和特异性进行初步的评价。
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第三部分 埃博拉病毒 RPA 检测方法的建立与应用
遗传物质为 RNA 的病毒属于 RNA 病毒。对于 RNA 病毒来说,在其复制过程中,需要转录出其互补的 DNA 或者 RNA。对于 RNA 病毒的检测,需要用逆转录酶将其RNA 逆转录为 cDNA,然后才能进行扩增,因此,RNA 病毒的检测与细菌和 DNA 病毒的检测不同,需要有逆转录的步骤。另外,很多 RNA 病毒的变异往往较 DNA病毒变异大。为了探讨 RNA 病