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利用以精氨酸为衍生剂的降解糖柱后衍生荧光检测系统测定了食品中各种糖组分的含量

日期:2018年01月15日 编辑: 作者:无忧论文网 点击次数:1769
论文价格:免费 论文编号:lw201001071415237225 论文字数:1141 所属栏目:食品论文
论文地区:中国 论文语种:中文 论文用途:职称论文 Thesis for Title
    摘 要:本文使用岛津公司开发的,以精氨酸为衍生剂的降解糖柱后衍生荧光检测系统,并选择配位体交换色谱法为分离手段,获得了6 种降解糖的线性关系和检出限。本法重现性较好。利用该法测定了酱菜汁中的各种糖组分的含量,分析结果满意。 
Abstract : A post2column derivatization system and ligand exchange mode were used for the sensitive and selective determination of degradation sugar s in food. The linearity , limit of detection (LOD) and repeatability of six sugar s have been evaluated. This met hod has been used for the determination of degradation sugars in pickles juice wit h satisfactory result s.

    糖类作为生物的能源,具有重要的作用。因此它的检测,也受到人们的重视。目前采用最广泛的分析手段是高效液相色谱法。由于分离的目的不同,所以在液相色谱上开发出多种分离方法,例如,空间排斥色谱法、分配色谱法、配位体交换色谱法和阴离子交换色谱法等。而在检测手段上则多用示差折光检测器。因为这种检测器选择性差、灵敏度低,不适用于低浓度、复杂基底的样品分析,所以,又开发出了多种糖类的柱后衍生系统。
    岛津公司为方便用户,也开发出以精氨酸为柱后衍生剂的降解糖分析系统。该柱后衍生法可与多种分离方法结合,共同完成降解糖的分离与检测。本文以配位体交换色谱法为例,介绍了新开发的降解糖柱后衍生荧光检测系统。

    1  实验部分

    1. 1  仪器与试剂
    岛津降解糖分析系统(见图1) ,主要包括:在线脱气机DGU220A5 一台,输液泵LC220AD 两台,柱温箱CTO220A 一台,荧光检测器RF210AXL 一台,自动进样器SIL220AC 一台,及配位体交换色谱柱Shim2pack SCR2101C(300 ×7. 9 mm i. d. ) 一根。
    蒸馏水;精氨酸,生化制品,SIGMA 公司;硼酸,氨基酸分析用,和光纯药工业株式会社;麦芽三糖、蔗糖、葡萄糖、半乳糖、果糖、核糖、树胶醛糖,特级,和光纯药工业株式会社。
    1. 2  实验条件
    分离条件:流动相:蒸馏水,流速:0. 8 mL/ min ,温度:80 ℃。
    检测条件:激发波长320 nm ,发射波长430 nm。
    衍生条件:衍生液:1 %L2精氨酸,3 %硼酸;流速:0. 5 mL/ min ;反应温度:150 ℃。
    1. 3  样品处理
    酱菜汁经0. 45μm 的膜过滤后,直接进样10μL 。


    2  结果与讨论

    2. 1  标准品的分析
    分别配制12. 5μg/ mL 、25μg/ mL 、50μg/ mL 、100μg/ mL 的标准品,依次进样10μL ,得到6 种降解糖组分的工作曲线,并根据3σ计算方法的检出限(见表1) 。所有组分的相关系数都达到3 个9 以上,检出限在16. 6~135. 3 pmol 之间。 
 
   用25 ppm 的标准品连续进样6 次,每次进样10μL ,以获得该方法的重现性,结果见表2 、表3 。其中,保留时间的重现性(RSD %) 最小值为0. 006 ,最大值为0. 052 ;峰面积的重现性(RSD %) 最小值为0.933 ,最大值为4. 771 。 
 

    2. 2  实际样品分析
    图1 为6 种降解糖标准的色谱图。采用上述实验条件及前处理方法,对酱菜汁中的降解糖进行了测定,结果见表4 和图3 。保留时间5. 912的峰在麦芽三糖前出,为酱菜汁中的多糖。本次实验依据保留时间定性,依据外标曲线和峰面积定量。 
 
 

    3  结论

    柱后缓冲电导检测法的线性、重现性都表现出了良好的结果,检出限适合食品样品中低浓度、复杂基
底的样品分析。