4 总结与展望
4.1 总结
本论文基于类ALP催化活性的纳米酶PAA-CeO2和绿色Zr基MOFs MIP-202(Zr)，分别建立了用于高灵敏检测疾病生物标志物PSA的化学发光免疫分析新方法和用于高灵敏检测ALDS的荧光分析新方法。具体结论如下：
① 首先，通过沉淀法制备了纳米酶PAA-CeO2，其表面具有丰富的羧基官能团，这有利于其与抗体进行共价或静电结合。然后，PAA-CeO2可催化CL底物CDP-Star的去磷酸化，证明了PAA-CeO2具有有效的类ALP催化活性。其次，发现了16%（v/v）[BMIM][BF4]作为辅助添加剂可实现PAA-CeO2/CDP-Star体系的信号放大，其信号放大机理在于[BMIM][BF4]能提高CDP-Star的CL量子产率。最后，首次构建了一种基于类ALP纳米酶标和离子液体辅助的高灵敏化学发光免疫分析新方法。以PSA为模型分析物，引入16%（v/v）[BMIM][BF4]时，该方法检测线性范围为0.1 pg/mL-10 ng/mL，且检测限为53 fg/mL。与不加离子液体相比，[BMIM][BF4]的添加可进一步将该方法的检测线性范围提高2个数量级和灵敏度提高10倍。此外，该方法也具有良好的选择性和重现性。更重要的是，该方法首次将类ALP纳米酶用于免疫分析，为纳米酶免疫分析新方法的开发奠定了基础。
② 首先，首次报道了通过水热法制备的绿色Zr基MOFs MIP-202(Zr)具有类ALP催化活性，可以催化底物p-NPP和4-MUP的去磷酸化。然后，以4-MUP为底物模型，发现了MIP-202(Zr)的催化活性强于ZrCl4和Zr(OH)4，且其在较宽的pH值和温度范围内耐受性强，对底物4-MUP有较强的亲和力。其次，ALDS可通过P-O键与MIP-202(Zr)的Zr-O簇形成强络合的Zr-O-P键，阻碍MIP-202(Zr)与其底物4-MUP的相互作用，进而抑制4-MUP的去磷酸化，基于这一现象，构建了一种基于MIP-202(Zr)/4-MUP体系的ALDS荧光传感方法。该方法的检测线性范围为0.01-0.1 μg/mL和0.1-3 μg/mL，检测限低至2 ng/mL，且具有良好的选择性。此外，可实现对尿液中ALDS的高灵敏检测，为临床样品中ALDS的检测提供了一种便捷可靠的有效检测方法，具有广阔的应用前景。
参考文献（略）
