本文是一篇医药学论文，本文通过剂型改良的方式来改善其溶解度、提高其稳定性，从而提高其生物利用度。
1 绪论
1.1 陈皮的研究概况
中药陈皮是芸香科植物柑橘（Citrus reticulata Blanco）及其栽培品种的干燥果皮，主要由外果皮、中果皮和内果皮组成。陈皮在中国的入药历史悠久，早在《神农本草经》中就对其有所记载[1]，是燥湿化痰、健脾理气的良药。陈皮的主要产地为广东、四川、贵州、浙江等地，其中以广东新会陈皮最佳，《本草纲目》中提到：“陈皮，今天下以广中（即新会）来者为胜”。除单独入药发挥药理作用以外，在包括回生饮、加味补中益气汤、红花当归散、沉香通气丸、加味平胃散和赤茯苓汤在内的多种经典处方中亦可见陈皮的身影。由此可见，陈皮在保护人体健康方面发挥了巨大作用。
1.1.1 陈皮的化学成分
陈皮所含的化学成分非常复杂，迄今为止已经被文献报道的化合物超过200种，黄酮类、生物碱类、芳香酸类、萜类与挥发油等都为其所含成分。
黄酮类成分 黄酮类物质是陈皮中含量最多、种类最多的成分，包括黄酮、黄烷酮、查尔酮、二氢黄酮等多种类型。陈皮中所含的黄酮类物质的种类及含量会受到陈皮储存时间和产地的影响。总的来说，陈皮中包含的黄酮类物质有：橙皮苷[2]、橙皮素[2]、鸢尾黄素[3]、小麦黄素[4]、芹菜素[5]、甜橙素[3]、二氢杨梅素[4]、橘皮素[6]、新橙皮苷[5]、枸橘苷[5]、根皮苷[4]、姜黄素[4]、山柰酚-3-O-芸香苷[7]、3,3',4',5,6,7-六甲氧基黄酮[8]、5-羟基-2',4',5',7-四甲氧基黄酮[9]、圣草次苷[4]等。
1.2 橙皮素的研究概况
橙皮素是一种广泛存在于甜橙、柑橘和柠檬等柑橘类水果中的黄酮类化合物[49]。特别是在一些未成熟的果实中橙皮素含量可达40%以上[50]。橙皮素的分子式为C16H14O6，呈淡黄色针状结晶。如图1.6所示为橙皮素的化学结构式，由于分子中具有一个手性中心，因此具有一对对映异构体，有文献称该类化合物在中药中和食物中的R/S比值不同[51]，但目前为止对其在药动学或药效学方面是否存在立体选择性的研究还非常有限。药理学研究表明，橙皮素的药理作用非常广泛，包括抗氧化、抗病毒、提高机体免疫力、保护心脑血管等多种作用。然而，由于其水溶性差（仅为2.6 μg/mL），在很大程度上限制了它的临床应用。
1.2.1 橙皮素的药理作用
① 抗心力衰竭
心力衰竭主要以心肌肥厚、纤维化、氧化应激和心肌细胞凋亡为特征。Deng等[52]采用了主动脉束带小鼠测定了橙皮素对心肌肥厚、纤维化和心脏功能的影响。结果表明橙皮素通过阻断心肌蛋白激酶B（AKT）信号传导激活来抑制压力过大引起的心肌肥厚；消除肥厚心脏中转化生长因子β1蛋白（TGFβ1）mRNA的表达和Smad2/3磷酸化，从而抑制纤维化；阻断心肌蛋白激酶C（PKCα/βII-AKT）、JNK和TGFβ1-Smad信号通路的激活，从而减轻压力过大引起的氧化应激和心肌细胞凋亡。
② 抑制类癌肿瘤
类癌肿瘤是一种主要发现于胃肠道和肺系统的神经内分泌肿瘤。与腺癌相比，它们生长缓慢，但其经常转移到肝脏。一旦转移，它们会分泌5-羟色胺、嗜铬粒蛋白A（CgA）和神经元特异性烯醇化酶等激素和肽。这些物质会引起诸如潮红、腹泻、喘息和心力衰竭等衰弱症状。
研究发现Notch1信号通路在结肠癌、肾细胞癌和非小细胞肺癌中具有致癌性，但在神经内分泌肿瘤（如类癌、甲状腺髓样癌和嗜铬细胞瘤）中，其活性非常低或不存在[53]。Notch1的活化已被证明可以抑制神经内分泌肿瘤标志物的表达，抑制胃肠道和肺类癌以及甲状腺髓样癌的增殖[54]。
2 陈皮配方颗粒的成分分析
2.1 引言
陈皮在中国的种植史以及入药史都非常悠久，自古便有“陈皮宜五脏，统治百病”的说法，在广东民间甚至有“一两陈皮一两金，百年陈皮赛黄金”的美誉。随着现代科学的发展，陈皮中所含的化学成分已经逐渐清晰，之所以“陈久者良”是因为陈皮中的黄酮类和挥发油成分的含量会随着陈皮储存时间的延长而增加。其中，黄酮是最主要的生物活性成分[123]，发挥着预防动脉粥样硬化、降血压、降脂、清除自由基、抗真菌、抗肿瘤等药理作用。因此，陈皮具有非常高的药用价值。
陈皮配方颗粒是由陈皮经过水提、分离、浓缩、干燥、制粒这5个步骤制成的颗粒，与传统的水煎剂相比，极大的方便了患者的使用和携带，有利于运输和保存。但在颗粒剂的制备过程中不可避免地会导致一部分活性成分的损失，且迄今为止，还没有研究对陈皮配方颗粒的成分进行全面分析，因此，本章实验利用UHPLC-Q-Exactive Plus仪器对陈皮配方颗粒所含的成分进行研究。
2.2 仪器与药品
2.2.1 仪器
3 橙皮素纳米乳的研制和体外性能的初步考察 .......................... 29
3.1 引言 ........................................ 29
3.2 仪器与试剂 ............................. 29
4 橙皮素纳米乳吸收机制的研究 ............................... 47
4.1 引言 ...................................... 47
4.2 仪器与试剂 ................................. 48
5 总结与展望 ............................ 61
5.1 总结 .......................................... 61
5.2 展望 .................................... 62
4 橙皮素纳米乳吸收机制的研究
4.1 引言
在上一章的实验中成功制备得到了橙皮素纳米乳剂，并对其质量进行了初步评价。然而，该乳剂是否能够提高药物的生物利用度还未可知，因此，本章实验的目的就是对乳剂的吸收机制进行系统的研究。
口服药物吸收进入体循环可发生在口腔、胃、小肠、大肠、直肠等部位的上皮细胞处。小肠包括空肠、回肠和十二指肠，由于具有皱襞和绒毛使其成为了最重要的吸收部位，皱襞有效扩大了小肠的吸收面积；绒毛内含有丰富的毛细血管和乳糜淋巴管，图4.1为小肠绒毛的解剖示意图。
肠道淋巴转运会显著影响血浆药物水平[85]。乳糜微粒是主要由三酰甘油组成的密度最低的脂蛋白，也是将药物转运到淋巴系统的最重要载体，肠道淋巴管中的化合物在左颈内静脉和锁骨下静脉的交界处进入体循环，有效避免了肝脏的首过效应[141]。查阅文献发现纳米乳中的油相会对胃肠道产生刺激从而增加乳糜微粒的分泌，极大提高药物经淋巴途径转运进入体循环的量[142]。
本章实验中，采用Ussing chamber模型研究了药物在三种不同小肠段的吸收情况，比较了口服橙皮素和橙皮素纳米乳后大鼠的血浆药物浓度，进一步采用大鼠乳糜微粒流阻断模型来对药物的淋巴转运比例进行探究，以探究药物在体内的吸收机制。
5 总结与展望
5.1 总结
陈皮自古以来就是药食两用的佳品。为了方便患者的携带与使用，制成了陈皮配方颗粒，由于颗粒制备的过程中要经历多个步骤，不可避免地导致某些活性成分的损失。因此本论文先对陈皮配方颗粒中所含的成分进行分析，再通过制备纳米乳载体的方式来提高陈皮配方颗粒中主要活性成分橙皮素的生物利用度。进一步对橙皮素纳米乳的质量进行了初步评价，并对其体外肠吸收、体内药代动力学和淋巴转运比例进行研究。具体的研究结论如下：
① 第一部分实验主要是利用UHPLC-Q-Exactive Plus仪器对陈皮配方颗粒所含的成分进行研究。分别考察了甲醇、50%的甲醇和乙腈作为溶解介质时药物的溶解度和总离子流图中物质的分离程度，并将50%的甲醇确定为溶解介质。根据文献和相关数据库的比对最终鉴定出了34种物质，包括橙皮素、橙皮苷、芦丁、柚皮苷、野漆树苷在内的黄酮类物质26种，辛弗林和N-甲基酪胺2种生物碱类成分，咖啡酸、阿魏酸、香草酸3种酚酸类物质和3种三萜类成分诺米林、柠檬苦素、黄柏酮。
② 第二部分实验是橙皮素纳米乳的研制及其初步稳定性的考察。首先是通过溶解度实验将三乙酸甘油酯确定为油相，利用伪三元相图将表面活性剂确定为EL35，助表面活性剂为DEGEE，Km值为1:1。进一步利用星点设计-响应面法以PDI和粒径作为评价指标对纳米乳处方进行优化，得到最佳处方为：7.15%的三乙酸甘油酯，38.71%蒸馏水，27.07%DEGEE和27.07%的EL35。制备得到的橙皮素纳米乳的平均粒径为12.7 nm，PDI为0.072，药物含量为9.66 mg/mL。稳定性考察结果表明，乳剂在室温下储存50天内可以保持良好状态，用不同pH的溶剂稀释不同倍数时各个参数均可保持稳定。体外释放度结果表明，与原药相比，纳米乳剂的释药比例明显提高，预测其可以有效提高橙皮素的生物利用度。
参考文献（略）
