[摘要]目的 通过检测癫癎患儿血清和脑脊液(CSF)神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白(S-100β)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的水平,了解小儿单次癫癎发作是否引起脑损伤。方法 采用电化学发光法检测20例癫癎发作后24 h内和38例对照组患儿血清和CSF中NSE水平,采用ELISA法测定其血清和CSF中S-100β、MBP水平。结果 癫癎组血清和CSF中NSE水平分别是(15.01±5.14)、(7.84±2.62)μg/L,对照组为(10.33±2.48)、(3.95±1.58)μg/L;癫癎组论文范文血清和CSF中S-100β水平分别是(0.39±0.15)、(0.59±0.20)μg/L,对照组为(0.11±0.05)、(0.29±0.19)μg/L;癫癎组血清和CSF中MBP水平分别为(0.23±0.09)、(0.33±0.07)μg/L,对照组为(0.23±0.06)、(0.31±0.07)μg/L。癫癎组血清和CSF中NSE、S-100β水平明显高于对照组(P均<0.01);癫癎组血清和CSF中MBP水平与对照组比较无显著性差异(P均>0.05)。结论 单次癫癎患儿血清和CSF中NSE、S-100β明显升高,提示单次癫癎发作可导致神经元损伤。
[关键词]癫癎;单次癫癎发作;神经元特异性烯醇化酶;S-100β蛋白;髓鞘碱性蛋白;脑损伤
研究表明血液和脑脊液(CSF)中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100蛋白(S-100)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平的变化,可反映神经元、胶质细胞、神经髓鞘膜结构损伤严重程度的状况[1]。癫癎发作是否引起脑损伤,一直是人们长期关注的问题。本研究对20例单次癫癎发作后患儿血清和CSF中NSE、S-100β、MBP的水平进行研究。现报告如下。
资料与方法
一、一般资料 癫癎组20例。男14例,女6例;年龄3个月~12岁,平均4.1岁。均有典型癫癎发作,脑电图表现有样放电;均行CT或MRI检查,根据文献[2]的诊断标准,确诊为特发性全面性癫癎13例,局限性癫癎7例。对照组38例。男21例,女17例;年龄6个月~10岁,平均4.1岁。为入院时均疑诊为颅内感染,经CSF常规、生化检查无异常,脑电图检查正常,并排除中枢神经系统(CNS)病变的上呼吸道感染患儿。
二、方法 1.癫癎组均于癫癎发作后24 h内抽取静脉血和CSF各2 mL,对照组入院后6~7 Am抽空腹静脉血和CSF各2 mL,于4℃离心20 min(3000 r/min),取上清液置-70℃冰箱中待检。无溶血标本。2.NSE测定采用电化学发光法,试剂盒和Elecsys 2010免疫分析仪由罗氏公司提供。S-100β和MBP测定采用双抗体夹心ELISA法,S-100β试剂盒由西安第四军医大学生理学教研室、MBP试剂盒由华西医科大学基础重组DNA研究室、MR4000ELISA检测仪由Dynatech公司提供。操作由专业人员严格按试剂盒说明书进行。
三、统计学处理 应用SPSS 11.0统计软件包,计量资料采用-x±s表示,组间比较用t检验,相关分析采用直线回归,P<0.05为有显著性差异。
结 果
一、两组血清和CSF中NSE、S-100β和MBP水平变化 见表1。
二、癫癎组血清与CSF中NSE、S-100β水平相关分析 NSE、S-100β水平经直线相关分析显示,呈高度正相关(r=0.587,0.784 P均<0.01)。
讨 论
癫癎发作是否引起脑损伤,一直是人们长期关注的问题之一。癫癎持续状态(SE)是最有可能造成脑损伤的一种发作形式。病理研究已证实,SE后可伴脑内选择性神经元坏死、神经元缺失、胶质细胞增生及海马硬化。NSE是主要存在于大脑神经元和神经内分泌细胞内并参与糖酵解的特异性酶,脑损伤时NSE从神经元中“漏出”,通过血脑屏障进入CSF和血液,故其改变可反映中枢神经系统受损程度[1]。王 雁等[3]通过检测不同发作类型SE患者的血清NSE发现,SE后血清NSE均有明显升高,其中以复杂局限性SE最为显著。SE后24~48 h血清NSE达峰值,后渐下降。洪思琦等[4]发现NSE峰水平与SE持续时间及结局显著相关,认为SE会造成脑损伤,这已得到许多学者认可。单次癫癎发作是否造成脑损伤争论较大。Willert等[5]发现癫癎患者单次癫癎发作后血清和CSF中NSE水平迅速上升,血清NSE水平于发作后24 h左右到达高峰,后渐下降,2周左右血清和CSF中NSE水平均降至正常。而Palmio等[6]却发现癫癎单次发作后24 h内,患者血清与CSF中NSE水平与正常对照组比较并无明显升高。
S-100蛋白是一种低分子质量高酸性的钙结合蛋白,由α、β两种亚基组成,其中S-100α主要存在于纹状肌、心脏和肾脏中,S-100β主要存在于中枢神经系统的星形细胞和少突神经胶质细胞,是神经胶质的标记蛋白,其水平变化可反映脑胶质细胞损伤的严重程度[7]。Dyck等[8]于2002年研究发现,S-100β基因敲除小鼠的癫癎易感性比正常小鼠显著升高,惊厥发作程度也明显加重,认为S-100β蛋白的表达在癫癎发病过程中起一定保护作用。Sendrowski等[9]在癫癎患儿血清中检测到S-100表达升高,但在CSF改变却不明显。有学者通过对颞叶癫癎患者的研究发现,癫癎患者血清S-100β的水平较对照组无明显改变,从而对S-100β蛋白是癫癎脑损伤的稳定标志物这一理论提出质疑。本实验结果显示,在癫癎发作后24 h内血清和CSF中NSE和S-100β均升高,说明癫癎全身性发作后有脑神经细胞损害。CSF是神经元代谢的重要场所,从理论上讲,CSF中NSE、S-100β水平应高于血清,且更能反映神经元的损害情况。但本研究癫癎组和对照组CSF的NSE、S-100β水平均低于同时采集的血清标本中的水平,与Sendrowski等[9]结果相似,其原因考虑主要与癫癎发作导致血脑屏障破坏,大量NSE、S-100β释放入血,而CSF中NSE、S-100β的稳定性又明显较血清中的稳定性差有关。
MBP是构成中枢神经系统髓鞘的一种碱性蛋白,主要存在于少突胶质细胞,与髓鞘脂质紧密结合,起着维持中枢神经系统髓鞘结构和功能稳定的作用,其血清水平的增高是急性脑实质损伤和脱髓鞘改变的特异性生化指标[10]。Connolly等[11]发现癫癎患儿血清MBP有显著升高,认为癫癎发作后存在髓鞘结构的破坏。但本研究癫癎组MBP水平与对照组比较均无明显差异,与文献报道不符。可能是由于本组均于癫癎发作后24 h内抽血和CSF,而文献报道血液和CSF中MBP水平的变化一般在脑神经损害后72 h才轻度升高有关。因此MBP可能不适合作为癫癎发作后脑细胞损伤的早期诊断指标。
综上所述,单次癫癎全身发作后早期即存在脑神经细胞的损伤和血脑屏障的破坏,故及时给予脑保护剂是必要的。本试验还发现NSE、S-100β在血清和CSF间存在较好的相关性,故临床对单次癫癎发作患儿早期可通过检测血清NSE、S-100β了解脑神经细胞的损伤情况。
[参考文献]
[1]李光乾,林忠东,叶秀云,等.热性惊厥患儿血清和脑脊液神经元特异性烯醇化酶S-100β蛋白及髓鞘碱性蛋白的测定[J].中华神经科杂志,2004,37(4):376-378.
[2]左启华.小儿神经系统疾病[M].第2版.北京:人民卫生出版社,2002:247-252.
[3]王 雁,谭 兰.癫癎持续状态患者血清神经元特异性烯醇化酶的变化[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2004,11(3):146-156.
[4]洪思琦,蒋 莉,陈 琼.惊厥患儿血清、脑脊液神经元特异性烯醇化酶变化的意义[J].实用儿科临床杂志,2006,21(11):701-702.
[5] Willert C,Spitzer C,Kusserow S,et al.Serum neuron-specific eno-lase, prolactin, and creatine kinase after epileptic and psychogenicnon-epileptic seizures[J].Acta Neurol Scand,2004,109(5):318-323.
[6] Palmio J, http://www.51lunwen.org Peltola J,Vuorinen P,et al.Normal CSF neuron-specificenolase and S-100 protein levels in patients with recent non-complica-ted tonic-clonic seizures[J].Neurol Sci,2001,183(1):27-31.
[7]赵 娟,谭延国.中枢神经系统疾患与S-100蛋白的关系[J].中国临床康复,2006,10(18):141-144.
[8] Dyck RH,Bogoch II,Marks A,et al. Enhanced epileptogenesis inS-100B knockout mice[J].Brain Res Mol Brain Res,2002,106(1-2):22-29.
[9] Sendrowski K,Sobaniec W,Sobaniec-Lotowska ME,et al. S-100protein as marker of the blood-brain barrier disruption in childrenwith internal hyd
