基于试验二，分别在无亮氨酸、正常浓度亮氨酸、高浓度亮氨酸（0、1、27 倍组，即 0、0.45、、12.15 mmol/L）的处理条件下，增加相应浓度的亮氨酸与 5 μM MG-132的混合添加处理，即分别为 0 倍亮氨酸、0 倍亮氨酸+ MG-132、1 倍亮氨酸、1 倍亮氨酸+ MG-132、27 倍亮氨酸、27 倍亮氨酸+ MG-132，共计 6 个处理组。其中每个处理 3个重复，处理时间为 3 小时。处理结束后分别收集细胞和上清培养液，-80℃冰箱冻存。使用试剂盒检测上清培养液中的 α-淀粉酶含量；Western-blot 检测 CCK1R 的蛋白表达；特异性荧光底物法检测蛋白酶体活性。
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