牙科手机灭菌效果的两种消毒方法分析
摘 要 目的:比较含氯消毒剂浸泡法和环氧乙烷气体灭菌法对牙科手机的灭菌效果。方法:利用枯草杆菌黑色变种芽孢和乙肝表面抗原阳性血清污染牙科手机,消毒后进行定量杀菌实验,帮写医学论文用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测HBsAg结果:牙科手机浸泡在有效氯含量为3000×10-6的消毒剂中30分钟,细菌杀灭率及乙肝表面抗原的抗原灭活率均未达到100%,而环氧乙烷灭菌法可达到100%。结论:环氧乙烷灭菌牙科手机效果可靠。
关键词 牙科手机 环氧乙烷 含氯消毒剂 灭菌
ABSTRACT Objective:To study the efficacy of two sterilizing methods on dental handpieces.Methods:Dental handpieces can-taminated with Bacillus subtilis var.niger spores and HBV were sterilized by two methods.The amount of bacterial culture were mea-sured after sterilization,and HBsAg was detected by using ELISA.Results:The efficacy of killing Bacillus subtilis var.niger spores anddestroying HBsAg antigencity on dental handpieces exposed to a solution containing chlorine 3000mg/L for 30 min were not 100%,meanwhile ethylene oxide were 100%.Conclusion:The efficacy of sterilization with ethylene oxide on dental handpieces was reliable.
KEY WORDS dental handpieces sterilization ethylend oxide Trichloroisocynuric acid
牙科手机是口腔科中使用最频繁的器械,在使用过程中必然沾上患者的唾液、血液等体液,污染较为严重,若消毒不彻底将成为医源性交叉感染的主要途径。流行病学调查资料表明,消毒后牙科手机HBV的污染仍可达8·33%—33·33%[1],又由于牙科手机结构的特殊性和其价格昂贵等因素,使其消毒方法受到很大限制,它的灭菌问题一直是口腔界急需解决的一个难题。本研究通过采用氯制剂(主要成分:三氯异氰脲酸)浸泡法和环氧乙烷灭菌法对实验室污染的牙科手机进行灭菌,探讨适用于牙科手机灭菌的可靠方法。
材 料 和 方 法
1 材料
1·1 实验菌:枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC9372):由中国军事医学科学院五所提供。纯化HB-sAg(1mg/ml)(北京爱尔比科技开发公司提供,批号:20020708)。乙肝表面抗原酶联免疫(ELISA)试剂盒(北京四环生物工程制品厂提供,批号:2002414)。
1·2 消毒剂及灭菌方法:氯制剂(主要成分:三氯异氰脲酸,有效氯浓度3000×10-6、浸泡30分钟)、环氧乙烷灭菌法(环氧乙烷气体熏蒸:将牙科手机封装后放入环氧乙烷灭菌器中灭菌12小时,灭菌温度:60℃,湿度:60—80%,气体浓度,1500mg/L)。
1·3 环氧乙烷灭菌指示器材:生物指示器材,枯草杆菌黑色变种芽孢。菌种及培养器(3M公司)。
2 方法
2·1 悬液的制备:
2·1·1 菌悬液的配置:取枯草杆菌黑色变种芽孢第四代菌悬液,用磷酸盐缓冲液(phosphate buffersolution,PBS)制备成含菌量为107—108cfu/ml的菌悬液,用麦氏比浊管测定菌悬液浓度。
2·1·2 HBsAg悬液配置:用磷酸盐缓冲液将lmg/ml HBsAg稀释至100μg/ml。
2·2 牙科手机染菌、染病毒方法:分别用菌悬液、HBsAg悬液浸泡手机机头5cm,沥干,置于37℃恒温箱中干燥30分钟,制成实验室污染牙科手机。
2·3 染菌手机的杀菌实验:实验分为两组,实验组(10把手机):将染菌后的手机全部浸入消毒剂中,作用至预设时间后取出,放入中和剂中中和10分钟,取出手机分别放入洗脱液中震荡40秒,取洗脱液0·5ml作琼脂倾注接种,置37℃恒温箱中培养72小时观察结果,每个样品接种2个平皿,计算其平均菌落数。对照组:以PBS代替消毒剂进行实验,洗脱液培养,回收菌量作为实验阳性对照(2把手机);中和剂、培养基直接培养作为实验阴性对照。
2·4 灭菌效果检查:分别将灭菌后的牙科手机置于硫乙醇酸盐液体培养基中,37℃恒温、需氧、连续培养5天。同批次实验用培养基直接培养作为阴性对照。
2·5 HBsAg破坏实验:灭菌处理后的实验组和对照组污染HBsAg的牙科手机,每支手机分别置于洗脱液中震荡40秒,将洗脱液进行离心,弃去上清液,用ELISA试剂盒检测HBsAg抗原性作为试验组。以PBS代替消毒剂进行试验,用ELISA试剂盒检测洗脱液HBsAg抗原性作为阳性对照组,中和产物为阳性对照组。用美国制造BIO-RAD酶标仪。在450nm波长下测定各孔的吸光度值(OD值),以实验组OD(S)值与阴性对照OD值(N)比值S/N≥2·1结果判为阳性。
结 果
1 灭菌效果:环氧乙烷对实验室污染的牙科手机全部达到灭菌效果,氯制剂浸泡后的器械仍有1件检菌阳性。
2 杀菌效果:环氧乙烷灭菌法对牙科手机人为污染的枯黑杀灭效果优于氯制剂浸泡法。
讨 论牙科手机是口腔科最常用的器械,由于在操作过程中其表面和内部管路污染较严重,属高度危险品,必须灭菌,即达到100%。若灭菌不合格,其潜在的交叉感染危险性极大[2]。本实验选取枯草杆菌黑色变种芽孢(化学灭菌的代表菌种)、HBsAg(病毒抗性代表)对牙科手机进行实验室污染,污染方法采取浸泡加滴染可污染手机表面和内部管路,取样方法采取洗脱液震荡法,不仅可检测到手机表面还可检测到手机内部灭菌效果,因此本实验可较准确的评价消毒剂对牙科手机的灭菌效果。
实验结果显示,含有效氯浓度3000×10-6的氯制剂浸泡污染的牙科手机30分钟后,手机检测件数中仍有20%检菌阳性、10%HBsAg检测阳性;而环氧乙烷灭菌器灭菌后的手机检菌阴性及HBsAg抗原性检测阴性均达到100%。前者可能是由于牙科手机结构复杂、内部管路腔隙较多,消毒剂很难彻底进入内部管路、腔隙中,使得灭菌效果不理想。武迎宏等人[3]的实验表明:对于能充分暴露于消毒剂中的器械如:车针、扩大针等即使污染严重,浸泡在含氯消毒剂中仍可达到灭菌标准。环氧乙烷蒸气在灭菌时因形成负压,所以对灭菌物品的穿透性特别强,可杀灭各种微生物[4],又因其灭菌温度低,一般在50—60℃,对物品损伤小,不腐蚀金属等,特别适用于不耐高温物品的灭菌。本实验结果证实,环氧乙烷对污染牙科手机灭菌效果肯定,值得推广使用。
虽然80年代以后生产出耐高温高压的牙科手机,但是手机内部有些部件在高温情况下仍易老化或发生氧化反应,缩短手机使用寿命。而环氧乙烷消毒则可弥补以上缺点,但它是一项专业性很强的工作,只有专门技术人员才能操作。它需将手机统一集中到一个专业部门大批量集中处理,目前虽未普遍用于牙科手机的消毒,但是随着社会化服务的不断发展,它将成为牙科手机主要灭菌方法之一。
参 考 文 献
1 饶 林,黄铭西.牙科手机消毒进展.中国消毒学杂志.2000;17(1):22
2 Checchi L,Montebugnoli L.Contamination of the turbineair chamber:a risk of cross infection. J Clin Periodontol.1998;25(8):607
3 武迎宏,邓小虹,罗 薇等.临床口腔器械灭菌方法比较.中华医院感染学杂志.2000,10(3):200
4 孙 汝,顾 健.环氧乙烷气体对灭菌物品包装材料穿透力的实验研究.现代预防医学.1997,24(3):267·28·北京口腔医学 2003年 第11卷 第1期
