2结果
2.1早期胃印戒细胞癌的组织结构H E切片显示,印戒细胞在胃黏膜层形成典型的分层结构(layered structure),见于38例标本.该结构可分为上下两层,浅表层为经典型印戒细胞,体积较大,靠近胃黏膜表面,而基底层位于黏膜中部,其细胞构成具有两种形式:(1)由体积较小的印戒细胞或原始癌细胞构成,其核/浆比大,并逐渐向浅表层过渡为体积较大的印戒细胞(图1A);(2)由异型增生的峡/颈部细胞构成,直接向黏膜浅表层移行过渡为典型的印戒细胞(图1B).在解剖位置上,分层结构位于黏膜层的中上部,与胃单元的峡/颈部区域重叠(图2A),同时分层结构下方的胃腺细胞可保持正常(图1A),或仅有轻度异型增生(图1B).
2.2分层结构中癌细胞的分化特性分层结构上下层细胞在形态上显示两者分化程度不同:浅表层典型的印戒细胞,其体积较大,胞质内黏液丰富,细胞核受挤压呈弯月形,偏位,总体形态上接近于胃小凹上皮;基底层的癌细胞体积较小,核/浆比大,胞质略嗜碱,形态与峡/颈部细胞相似,并可向黏膜浅表移行为经典的印戒细胞,反映其分化更为原始(图1).免疫组织化学双染显示,在所有病例中,浅表层印戒细胞MUC5AC表达呈强阳性,而越接近基底层MUC5AC表达越弱,到达分层结构底部时癌细胞MUC5AC表达呈弱阳性或不表达(图2B).MUC6在大多数病例的分层结构内不表达,只有少数病例(11/42)可在分层结构的基底层见少数MUC6阳性的癌细胞(比例<10%).
2.3分层结构中癌细胞的增殖特性Ki67标记显示胃单元的增殖区,并可见分层结构尤其是基底层的癌细胞与癌旁胃单元的增殖区在空间位置上重叠.进一步观测发现,分层结构基底层的癌细胞增殖较活跃(阳性比率为28.7%±4.3%),而越靠近浅表层,印戒细胞Ki67阳性率越低(图2C),经统计浅表层的经典型印戒细胞Ki67表达率为6.2%±1.2%,显著低于基底层低分化的癌细胞(t=31.0,P<0.01).
2.4分层结构中癌细胞m u s a s h i-1的表达musashi-1染色标记胃单元峡/颈部区域,与Ki67标记的连续切片对比可发现这一区域涵盖了增殖区.分层结构上下两层细胞musashi-1的表达不同,其中基底层低分化癌细胞的阳性率为35.3%±4.4%,向浅表层移行的过程中musashi-1表达下降,分层结构浅表层经典型印戒细胞的表达阳性率为13.8%±3.8%,显著低于基底层低分化的癌细胞(t=22.8,P<0.01,图2D).
2.5癌旁黏膜增殖区的改变对癌旁胃黏膜的观察显示,其形态与正常胃黏膜存在差异,这种差异主要位于增殖区(31/42)及胃小凹(39/42).增殖区的改变表现为该区域延长,细胞增殖活跃,并具有异型性,其细胞核增大、深染,分裂象易见,而胞质减少,明显嗜碱性(图3A,B),免疫组织化学染色显示增生的细胞MUC6呈阴性,而MUC5AC呈弱阳性,并表达musashi-1(图3C,D).胃小凹表现为长度增加,并且分枝,黏液细胞体积明显增大,可呈气球状(球样增生),胞质黏液丰
