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基于二氢叶酸合成酶的磺胺类药物多残留快速检测分析研究

日期:2018年01月15日 编辑:ad201107111759308692 作者:无忧论文网 点击次数:2197
论文价格:150元/篇 论文编号:lw201411231422534785 论文字数:23600 所属栏目:医学检验论文
论文地区:中国 论文语种:中文 论文用途:硕士毕业论文 Master Thesis
ve Binding Affinity,RBA)作为判断DHPS与擴胺药物的结合能力的指标。
(1)包用包被液将DHPS稀释成适当浓度加至酶标板,lOOuL/孔,37X:解育2h。
(2)洗漆:倾去孔内余液,用洗漆液洗1遍,300nL/孔,在吸水纸上拍干。
(3)封闭:加入封闭液150^1/孔,37°C辉育Ih,取出后直接拍干。
(4)加样:各孔先加入50 mL系列浓度的擴胺类药物标准品,再加入50^lL稀释成适当浓度的酶标记物,371:孵育3011〗111。
(5)洗漆:倾去孔内余液,用洗液洗4遍,300nL/孔,在吸水纸上拍干。
(6)显色:加入新鲜配制的TMB溶液,lOOuL/孔,避光37°C显色lOmin。
(7)终止:加入 2MH2SO4,50nL/孔。
(8)测定:用酶标仪读取各孔0D450 nm (双波长:630 nm为参考滤光片波长。
(9)计算各种药物的IQ。值;以SQX为参照,计算相对亲和力,如公式5-1。RBA% = ICsoCSMM)/ ICsoC 目标物)公式 5-1
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结论

6.1制备了磺胺类药物受体蛋白DHPS
体外扩增来源于肺炎