抗肿瘤植物的筛选及其有效成分的分离纯化

摘要 恶性肿瘤是危害人类健康和生命的主要疾病之一，目前国际上对 恶性肿瘤的治疗以手术和放化疗为主，但是目前临床上使用的化疗药 物在杀伤肿瘤细胞的同时，对机体正常的细胞也发生损害，从而使治 疗不能顺利进行。中医药在治疗肿瘤方面有着悠久的历史，从中药中 寻找抗肿瘤效果好、毒副作用低的成分是开发新的抗肿瘤药物的重要 途径。 选6种中草药作为抗肿瘤中药材的研究对象:豆科植物野百合、 唇形科植物香茶菜、桔梗科植物半边莲、天南星科植物华东磨芋、天 南星科植物滴水珠、天南星科植物异叶天南星。 采用乙醇加热回流法对6种中草药进行提取，并浓缩提取液成浸 膏。通过MTT法体外实验研究发现半边莲有较好的抑制SGC-7901肿 瘤细胞生长的作用。 曲面响应法优化提取条件，得知取半边莲3. OOg，固液比例1: 25, 提取时间为4. 6h;甲醇浓度为99%;提取温度为59.14℃时，将会有 最大提取效率。 采用柱层析法分离纯化及制备半边莲抑制肿瘤细胞生长的有效 成分。主要选择弱极性或非极性的填料如SD3oo , SD301，活性炭 浙江工业大学硕士学位论文抗肿瘤植物的筛选及其有效成分的分离纯化摘要 (10-40Nm)。根据填料吸附量以及解析率最终确定填料SD3o,为柱层析 填料。考察样品浓度、不同温度、进样流速、盐效应、层析柱的径高 比、样品不同pH值等因素对填料吸附率和吸附量的影响。结果显示 当以0. lmol/L的NaCl溶液配制样品溶液，且保持样品pH=7，吸光 度值为0.7左右，室温下以4ml/min的流速进样，柱子填料的径高比 为1:12时，将有最大填料吸附量。 不同浓度乙醇溶液以及丙酮溶液为洗脱液，通过对峰形的考察， 确定洗脱流速以及洗脱液的种类。最终确定了洗脱流速为2mYmin, 并以20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、100%乙醇、40%丙酮作为洗脱 齐1进行洗脱。 几何放大柱层析工艺，收集所得到的样品。MTT法药理实验表明， 其40%丙酮洗脱物较石油醚萃取物有更强的抑制SGC-7901肿瘤细胞 的作用。 关键词:半边莲，抗肿瘤，筛选，分离纯化