本文是一篇泌尿科论文，本研究发现，Pmp蛋白可能在C.t感染后粘附宿主细胞和机体免疫应答中具有重要功能，为研制疫苗的潜在抗原。因此本研究的目的是探讨泌尿生殖道感染患者沙眼衣原体多态膜蛋白F（polymorphic Membrane Proteins F，PmpF）基因的多态性,为研究多态膜蛋白F作为沙眼衣原体候选疫苗提供理论依据。
材料与方法
1 实验材料
1.1 主要实验仪器
2 实验方法
2.1 取材
2.1.1 取材对象
2013年1月~2014年12月就诊于解放军252医院泌尿科、妇科和皮肤科门诊的泌尿生殖道感染患者。受检病人须具备：男性有不同程度的尿道炎症状，女性有阴道异常分泌物，伴有或不伴有尿道刺激症状
2.1.2 取材方法
严格按照标准采集标本，并详实记录患者的年龄、性别、科室等资料。 男性：取尿道分泌物或细小棉拭子伸入尿道约2-4厘米，略捻拭子取出分泌物。将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
女性：阴道用无菌生理氯化钠溶液棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停15-20s后旋动棉拭子采取宫颈分泌物，将棉拭子置于无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
女性尿道用无菌生理氯化钠溶液棉球洗净尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米，略捻拭子取出分泌物。将棉拭子置于无菌玻璃管，用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。
结果
1 临床标本检测结果
2013年1月至2014年12月从妇科、泌尿科和皮肤科三个科室获得阳性标本178株，并按照一定顺序分别编号，以便后续研究方便。所有标本中来自男性为105个，占比为59%，来自女性的为73个，占比为41%；所有标本中来自妇科的为58个，占比为32.6%，来自泌尿科为88个，占比为49.4%，来自皮肤科的为32个，占比为18%；阳性标本患者年龄分布为20岁以下8人，占比为4.5%，20~30岁之间为91人，占比为51.5%，30~40岁之间为59人，占比为33.1%，30~40岁之间为59人，占比为33.1%，40~50岁之间的为19人，占比为10.1%，50~60岁之间的只有1人，占比为0.6%。
3 PmpF-RFLP 结果及多态性分析
本实验对获得的117个PmpF基因进行了限制性酶切分析，选择四种限制性内切酶(Alu I、Hae III、Rsa I、Mob I) 酶切后，得到由分子量大小不同的片段组成的酶切图谱。酶切电泳图谱如Fig.2，Fig.3，Fig.4和Fig.5。 PmpF酶切图谱经 GelcomparⅡ软件分析，将四种酶切图谱的结果进行合并聚类，构建UPGMA树状图。如Fig.6所示，所有117供试菌株根据4种内切酶酶切图谱可以分为个3个Type型，依次为Type1、Type2、Type3。3个Type型中，Type1有3株，占比为2.6%；Type2有43株，占比为36.8%；Type3有71株，占比为60.7%。Type3型占比最多，为本研究中优势菌株。从性别分布看，Type1型中，3株均为男性；Type2型中，21株来自男性，在该型中占比48.8%，22株来自女性，在该型中占比51.2%,；Type3型中，43株来自男性，在该型中占比60.6%，28株来自女性，在该型中占比39.4%。从年龄分布来看，Type1型中，2株为20～30岁，1株为40岁以上；Type2型中，26株为20～30岁，在该型中占比最多为43.3%；Type3型中，32株为20～30岁，在该型中占比最多为45.1%29株为30～40岁，在该型中占比次多为40.8%。从科室分布来看，Type1型中，3株均来自泌尿科；Type2型中，妇科，泌尿科和皮肤科占比分别为34.5%、39.5%和25.6%；Type3型中，妇科，泌尿科和皮肤科占比分别为35.2%、50.7%和14.1%。
讨论·······························24
结论·························26
讨论
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,C.t) 是一类专性活细胞内寄生的微生物，是人类普遍易感的病原体，主要引起眼部、呼吸道、泌尿生殖道感染。沙眼衣原体引起的沙眼是目前世界范围内后天致盲的首要因素；由沙眼衣原体导致的泌尿生殖道感染在工业化国家和发展中国家都很常见，每年全世界大约有9000万新病例，感染后会导致严重的后遗症包括盆腔炎、不孕和宫外孕、骨盆疼痛等；同时C.t引起的生殖道粘膜病变是HIV感染的协同因素，使感染HIV的危险性显著增加，它的存在促进人类免疫缺陷病毒的传播[14, 15]。根据其主要外膜蛋白（MOMP）的区别沙眼衣原体分为A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、Ja、K、Ll、L2、L2a、L3 19个血清型。其中C.t的A、B、Ba和 C型可以感染眼结膜的柱状上皮细胞引起沙眼；Ll、L2、L2a和L3型具有侵袭性，能够穿透黏膜感染单核细胞和巨噬细胞并在淋巴组织中繁殖引起性病淋巴肉芽肿(1ymphogranuloma venereum,LGV)；生殖道型D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K及基因变种Ja型感染生殖道上皮细胞引起泌尿生殖道[3]。沙眼衣原体引起的泌尿系统感染是沙眼衣原体最常见的感染，但在我们国家未引起足够的重视，我们对2013年1月至2014年12月就医于我院的泌尿系统感染患者的标本进行了沙眼衣原体感染状况研究，发现沙眼衣原体阳性标本178例，挑选部分代表菌株进行了血清学测定，结果为D、Da、E、F、G、H、J七种血清型，其中最多为E型，与已有报道结果一致。在这178例阳性标本中有117例扩增出了PmpF基因，其中男性67例，女性50例，说明男性在沙眼衣原体感染后产生多肽膜蛋白的能力要比女性强一些，这与已有报道一致[16]。
结论
1 妇科、泌尿科和皮肤科三个科室泌尿生殖道感染患者标本中分离到了178株沙眼衣原体阳性标本，感染主要发生在20～50岁之间，其中感染率最高的年龄段为20～30岁。
2 感染的沙眼衣原体血清型为D、Da、E、F、G、H和J七种血清型，与已有报道结果一致。
3 Alu I、Hae III、Rsa I、Mob I四种内切酶聚树将117株沙眼衣原体分为3个Type型，Type3占比为60.7%，为本研究中优势Type型。基于测序的系统发育树也证实了以上的分型结果。
4 PmpF基因Type型与性别、科室分布无关，而与年龄具有相关性，20岁以下患者中，Type2型最多，20岁以上患者中，Type3型为优势型。
参考文献（略）
